ИЗУЧЕНИЕ ФЛАВОНОЙДНОГО СОСТАВА ЛЕКАРСТВЕННОГО РАСТИТЕЛЬНОГО СЫРЬЯ ПРЕДСТАВИТЕЛЕЙ РАЗНЫХ ВИДОВ РОДА CRATAEGUS L.


Валдас Якштас, Валдимарас Янулис, Юозас Лабокас*

  Кафедра фармацевтической химии и фармакогнозии Каунаского медицинского университета, ул. А. Мицкявичяус 9, Каунас, Литва (Department of Pharmaceutical chemistry and pharmacognosy, Kaunas university of medicine, A. Mickevičiaus 9, Kaunas, Lithuania);
* Лаборатория економической ботаники Института ботаники, ул. Жалюю ежеру 49б Вильнюс (Insitute of botany, Laboratory of economical botany, Žaliųjų ežerų 49, Vilnius, Lithuania).



Писать Якштасу В., Кафедра фармацевтической химии и фармакогнозии Каунаского медицинского университета, ул. А. Мицкявичяус 9, Каунас, Литва. Е-почта: farmakog@kmu.lt , valdas.jakstas@one.lt , тел: +370-672-00844.
   Correspondence to V. Jakštas, Department of Pharmaceutical chemistry and pharmacognosy, Kaunas university of medicine, A. Mickevičiaus 9, Kaunas, Lithuania, e-mail: farmakog@kmu.lt , valdas.jakstas@one.lt, tel: +370-672-00844.

Analysis of amounts of flavonoids in crude drug of some species of genus Crataegus L.
Jakštas Valdas, Janulis Valdimaras, Labokas Juozas

 Key words: hawthorn, species, flowers, leaves, flavonoids
 Summary. Research of amounts of flavonoids occuring in leaves and flowers of some single-styled hawthorn (Crataegus monogyna Jacq.) populations fenotips in Lithuania and amounts of flavonoids occuring in leaves and flowers of some collect Crataegus and Crataegomespilus species. Objective. Establishment of the differences in amounts of flavonoids between hawthorn populations and single fenotips. Materials and methods . Different examples of raw materials were extracted with 96 per cent of ethanol and flavonoids were detected spectroscopicaly and with high performance liquid chromatography. Results. In examples of leaves and flowers of single-styled hawthorn were determinated  1,30–2,77 per cent of flavonoids; amounts of hyperosid were 0,48–1,09 per cent, particulary perspective crude drug are from Šušvė river region. At leaves and flowers of hawthorn species, introduced in Lithuania are determinate different quantity’s of  common amounts of flavonoids (1,07 - 2,53 per cent) and different quantity’s of  individual substances.Conclusions. Determinated statistically significant differences of quantitys of flavonoids between some examples of single-styled hawthorn raw materials. Flowers and leaves of hawthorn species, introduced in Lithuania, can be use to prepare of crude drug.



 Ключевые слова:  боярышник, вид, цветки, листья, флавонойды
 Резюме.  Анализ качественного состава флавонойдов в цветках  и листьях боярышника однопестичного (Crataegus monogyna Jacq.), собранных в разных регионах Литовской Республики и некоторых колекционных видов родов Crataegus и Crataegomespilus. Цель исследования. Установить различие флавонойдного состава между популяциями и отдельными фенотипами боярышника. Материалы и методика  исследования. Пробы лекарственного растительного сырья экстрагированны 96 проц. этанолом и анализированы спектрофотометрическим и методом высокоэффективной жидкостной хроматографии. Результаты. Сумма флавонойдов в цветках и листьях боярышника однопестичного составила от 1,30 до 2,77 проц., количество гиперозида 0,48 - 1,09 проц., лекарственное растительное сырье собранное в популяции басейна реки Шушве очень персективно. Содержание флавонойдов  в цветках и листьях интродуцированих видов боярышника составило 1,07 – 2,53 проц.. Выводы. Установлена зависимость количественного содержания флавонойдов в лекарственном растительном сырье от мест произростания представителей вида боярышника однопестичного на територии Литовской Республики. Цветки и листья боярышников интродуцированных на територии Литовской Республики могут служить как источник лекарственного растительного сырья с разным флавонойдным составом.

  Род боярышник (Crataegus L.) относится к семейству розоцветных (Rosaceae Juss.). Цветки и листья боярышника (Crateaegi folium cum flore ) являются фармакопейным лекарственным растительным сырьем и используются для производства галеновых препаратов и других лекарственных форм. Биологически активные вещества боярышника оказывают положительный эффект при функциональных растройствах сердечной деятельности I и II степени по NYHA (шкала Нью-Йоркской ассоцияций сердца), они также используются после тяжелых болезней, влиявших на работоспособность сердца и при гипертонии [1, 2, 3].

 Цветки и листья боярышника содержат флавонойды: гиперозид, кверцитин, витексин, витексинрамнозид, рутин, ацетилвитексинрамнозид, кверцитрин, ориентин, разные олигомеры процианидинов [1, 2, 3, 4, 5].

  К роду боярышник (Crataegus L.) относятся более 150 видов. Род и к нему принадлежащие виды характеризируются высокой степенью изменчивости. Межвидовая гибридизация, интрогрессия, полиплойдия, и апомиксис положительно влияют на возникновение новых линий генотипа [6].  Представителям розоцветных (Rosaceae Juss.) характерна и межродовая гибридизация, которая еще повышает изменчивость данных видов. Выше указаные обстоятельства способствуют возникновению гибридов как в природе, так и в колекциях ботаничесих садов. Изучение флавонойдного состава лекарственного растительного сырья, загатовленого с натуральных или антропогенных  гибридов помогает выявить и оценить новые линий генотипа, которые могут служить для получения сырья высшего качества или с уникальным  составом флавонойдов и, как последствие, с уникальными фитотерапевтическими параметрами.

Цель исследования: выявить и оценить возможные различия в флавонойдном составе лекарственного растительного сырья боярышника однопестичного (Crataegus monogyna Jacq. ), собранного в некоторых регионах Литовской Республики и изучить флавонойдный состав лекарственного растительного сырья колекционных фенотипов разных видов рода боярышник (Crataegus L.) и  гибридного вида +Crataegomespilus dardarii Simon-Louis (синоним +Crataegomespilus asnieresii (Koehne) C. K. Schneid.).


 Цветки и листья боярышника однопестичного (Crataegus monogyna Jacq. ), собранные в 2001 и 2002 годах во время цветения в разных регионах Литовской Республики; цветки и листья колекционных фенотипов разных видов боярышника: Crataegus chlorosarca Maxim., Crataegus chrysocarpa Ashe, Crataegus mollis (Torr. Et A. Gray) Scheele, боярышника сливолистного (Crataegus × prunifolia (Poir.) Pers.),  Crataegus submollis Sarg., боярышника крупноколючкового (Crataegus succulenta (Link) Shräd. var macracantha (Lodd.)), +Crataegomespilus dardarii Simon-Louis  собранные в колекции Каунаского ботанического сада в мае 2002 года (во время цветения) с веток нижнего арда (1,0 - 1,5 метра над поверхностью земли).


 Сырье экстрагировали 96 проц. этанолом в апарате типа Сокслетта. Полученный экстракт концентрировали до сухого остатка.  Сухой остаток экстрагировали 40 проц. этанолом. Полученный раствор сухого остатка филтрировали и разбавили до 50 мл и применяли для последущего количественного определения. Содержание суммы флавонойдов (в перещете на рутин) определяели спектрофотометрическим методом. К очищеному экстракту добавили раствор уксусной кислоты R и раствор алюминия хлорида R.  После образования комплекса флавонойдов с йонами алюминия, добавляли раствор гексаметилентетрамина R и полученый раствор спектрофотометрировали при длине волны 407 нм. При расчете процентного содержания суммы флавонойдов использовали стандартный образец рутина [4,5,7,8]. Содержание флавонойдов (гиперозида, кверцитина, витексина, витексинрамнозида, рутина, кверцитрина) в лекарственном растительном сырье определяли методом высокоэффективной жидкостной хроматографии используя прибор типа Waters с спектрофотометрическим детектором в переменной длине волны, колонкой типа XTerra RP18 (150×3,9мм, величина частиц сорбента 3,5 μм), подвижная фаза: ацетонитрил R и 1 проц. раствор трифлоруксусной кислоты R в воде R, скорость движения фазы 0,4 мл/мин [5,7,8].
Резултаты оценены методами математической статистики (10).


 Содержание суммы флавонойдов  в цветках и листьях боярышника однопестичного (Crataegus monogyna Jacq. ) собранных в 2001 г. в разных регионах Литовской Республики колеблется от 1,30 до 2,77 проц.. Полученные результаты обработали методом математической статистики. Установленна статистически значимая разница количественного содержания флавонойдов в лекарственном растительном сырье собранном в разных регионах Литовской Республики. Лекарственное растительное сырье собранное в популяции басейна реки Шушве отличается более высоким содержанием флавонойдов. В образцах собранных в этом регионе сумма флавонойдов составила 1,47 - 2,77 проц..  В цветках и листьях боярышника однопестичного собранных в 2002 г. в популяции реки Шушве сумма флавонойдов составила 1,34 - 2,80 проц.. Полученные данные 2002 года потверждают предположение о возможности натурального возникновения новой линий генотипа, которая может служить для получения сырья высшего качества, но для окончательного потверждения этого предположения, исследования в регионе реки Шушве надо продолжать.

  При изучений флавонойдного состава образцов лекарственного растительного сырья боярышника однопестичного собранного в регионах Литовской Республики методом высокоэффективной жидкостной хроматографии устоновлено, что содержание гиперозида колеблется в пределах 0,48 - 1,09 проц., витексинрамнозида 0,18 - 0,77 проц., кверцитрина 0,01 – 0,17 проц., рутина 0,05 – 0,11 проц..
Содержание суммы флавонойдов  в цветках и листьях разных видов боярышника культивирнемых в Каунаском ботаническом саду и собранных в 2002 г. составило от 1,07 до 2,53 проц. (1 таблица). По требовариям Ph. Eur. 2000 (Европейской фармакопеи 2000 года) сумма флавонойдов в лекарственном растительном сырье  боярышника должна быть не менее 1,5 проц. [5]. Нами устоновленноб что в образцах Crataegus × prunifolia (Poir.) Pers. и +Crataegomespilus dardarii Simon-Louis содержание суммы флавонойдов соответствовало требованиям Ph. Eur. 2000 и составляло соответственно 1,67 и 2,53 проц..

  Резултаты анализа флавонойдного состава образцов лекарственного растительного сырья боярышника полученного с колекционых фенотипов Каунаского ботанического сада приведены в таблице 2. Из данных таблицы 2 следствуетб что в образцах сырья Crataegus chlorosarca Maxim., Crataegus mollis (Torr. Et A. Gray) Scheele и Crataegus submollis Sarg. преобладает флавонойд гиперозид, и содержание других флавононойдов в образцах значительно отличяется. Витексинрамнозид преобладает в цветках и листьях Crataegus chrysocarpa Ashe и Crataegus succulenta (Link) Shräd. var macracantha (Lodd.), рутин - Crataegus × prunifolia (Poir.) Pers.. В цветках и листьях +Crataegomespilus dardarii Simon-Louis преобладает кверцитрин, немного менше гиперозида и витексина. Очевидная разница флавоного состава лекарственного растительного сырья колекционных фенотипов разных видов боярышника подтверждает возможность заготовки на територии Литовской Республики сырья высшего качества. Исследования колекционных образцов рода Crataegus в Каунаском ботаническом саду будут продалжатся.



1. Сумма флавонойдов в лекарственном растительном сырье боярышника однопестичного (Crataegus monogyna Jacq.), собранного в разных регионах Литовской Республики составила от 1,30 до 2,77 проц., количество гиперозида 0,48 - 1,09 проц..
2. Установленна статистически значимая разница количественного содержания флавонойдов в лекарственном растительном сырье, собранном в разных регионах Литовской Республики.
3. Содержание суммы флавонойдов в лекарственном растительном сырье колекционных фенотипов разных видов родов боярышника (Crataegus L.) и  +Crataegomespilus составляло 1,07 – 2,53 проц..
4. Цветки и листья боярышников, интродуцированных на територии Литовской Республики могут служить источником для получения лекарственного растительногом сырья.



1.    Barnes J., Anderson L. A., Phillipson J. D. Herbal Medicines. London Chicago: Pharmaceutical Press. 2002: 284 – 7.
2.    Blesken R. [Crataegus in cardiology]. Fortschritung medizin. 1992:110, 290 - 2.
3.    Crataegi folium cum flore. ESCOP. 1999.
4.    Государственная фармакопея СССР XI [USSR state pharmacopeia, Vol. 11]. Москва: Медицина. 1990, 1: 285, 2: 241 – 4.
5.    European Pharmacopea, supplement 2001. Strasbourg: Council of Europe. 2000:  930 – 1.
6.    Christensen K. I. Revision of Crataegus Sect. Crataegus and Nothosect. Crataeguineae (Rosaceae-Maloideae) in the Old World. SYSTEMATIC BOTANY MONOGRAFS. The American Society of Plant Taxonomists. 1992. 35: 1 – 4, 18 – 20, 100 – 113.
7.    Bohm B.A. Introduction to flavonoids. Harwood academic publishers. 1998: 194 – 204.
8.    Havsteen B. H. The biochemistry and medical significance of the flavonoids. Pharmacology & Therapeutics. 96 (2002): 89 – 90, 95 – 7.
9.    Čekanavičius V., Murauskas G. Statistika ir jos taikymai [Statistics and applications]. Vilnius: TEV. 2001. p. 33 – 9, 149 – 51.

К списку докладов на конференции  .